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科普知識
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分光光度計

分光光度計的兩大主要功能

發布日期:2022-10-09 點擊率:75

  定量分析和定性分析是分光光度計的兩大主要功能,特別是定量分析。其它的分析都應該是從這兩大種功能中發展出來的。下面來詳細介紹介紹:

  (1)定量分析

  根據瑯伯-比爾定律,樣品的濃度和吸光度是成正比關系的,濃度越大,吸收值越高,所以分光光度計用的最多的還是定量分析,定量分析的種類有很多,這里介紹常用的幾種定量分析方法:

  A、絕對法:絕對法是紫外可見分光光度計諸多分析方法中使用最多的一種方法。這是一種以瑯伯-比爾定律A=εbC為基礎的分析方法,某一物質在一定波長下ε值是一個常數,石英比色皿的光程是已知的,也是一個常數。因此,可用紫外可見分光光度計在λmax波長處,測定樣品溶液的吸光度值A。然后,根據瑯伯比爾定律求出C=A/εb,則可求出該樣品溶液的含量或濃度。

  B、標準法:在選定的波長處,在相同的測試條件下,分別測試標準樣品溶液C標和被測試樣品溶液C樣的吸光度A標和A樣。然后,按下式求得樣品溶液的濃度或含量。

  C樣=A樣/A標×C標

  C、標準曲線法

  紫外可見分光光度計最常用的定量分析方法是標準曲線法。即先用標準物質配制一定濃度的溶液,再將該溶液配制成一系列的標準溶液。在一定波長下,測試每個標準溶液的吸光度,以吸光度值為縱坐標,標準溶液對應得濃度為橫坐標,繪制標準曲線。最后,將樣品溶液按標準曲線繪制程序測得吸光度值,在標準曲線上查出樣品溶液對應的濃度或含量。

  A、其它分析方法

  除上述幾個分析方法外經常使用的分析方法外,還有比吸收系數法、最小二乘法、解聯立方程法和示差分光光度法。

  (2)定性分析

  如果未知物的紫外吸收光譜的最大吸收峰波長λmax、最小吸收峰波長λmin、最大摩爾吸光系數εmax,以及吸收峰的數目、位置、拐點與標準光譜數據完全一致,就可以認為是同一種化合物。定性分析的主要目的是知道分析樣品中是什么物質。

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