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分光光度計

紫外可見分光光度計的主要技術(shù)指標

發(fā)布日期:2022-10-09 點擊率:62

    紫外可見分光光度計可達到檢測質(zhì)量與成分的目的。在對不同的儀器進行分析時,紫外可見光光度計是常規(guī)的分析儀器之一,原理就是紫外可見光度法。


    紫外可見光光度計有很多的特點:


    如,由于選擇性好而且靈敏度較高,維護管理很方便,所以在使用中更為常見;


    第二,它的結(jié)構(gòu)較為簡單,可以很方便地進行操作而且在成本上又不是非常貴。


    以光路設(shè)計為基礎(chǔ),對紫外可見分光光度計進行分類,可以依據(jù)光路設(shè)計分為三種類型:單光束分光光度計、雙光束分光光度計以及雙波長分光光度計。


    鑒于此,本文主要分析紫外可見分光光度計主要技術(shù)指標及其檢定方法。


    1.紫外可見分光光度法工作原理以及相關(guān)應用


    紫外可見分光光度法的工作原理就是利用不同物質(zhì)的分子在紫外可見光譜區(qū)上的輻射吸收的不同,利用分子的這一特性來進行有效地區(qū)分辨別。


    紫外可見分光光度法在物質(zhì)的定性定量分析以及物質(zhì)純度分析物質(zhì)結(jié)構(gòu)分析等多種方面都有著廣泛的應用,起著不可或缺的作用。


    例如:此種檢測方法在食品行業(yè)中的運用,可以對食品的質(zhì)量進行有效地安全監(jiān)測。而對于生活質(zhì)量方面來說,食品衛(wèi)生及質(zhì)量是為重要的一點,只有確保食品不會出現(xiàn)安全問題,才能夠有效地促進國民健康生活。


    現(xiàn)階段,我國出現(xiàn)的食品安全問題有以下幾種:食品造假;在食品添加對人體有害的添加劑;一些非法添加物的濫用;除了這些主要問題之外還存在食品殘留農(nóng)(獸)藥、微生物或者重金屬等有害物質(zhì)的情況,以上情況都會造成食品出現(xiàn)質(zhì)量安全問題,因此必須對食品進行安全分析、檢測,確保食品不會出現(xiàn)質(zhì)量安全問題。


    2.紫外可見分光光度計主要技術(shù)指標


    波長準確度及其檢定方法


    波長的實際測定值和理論值相減,就是紫外可見分光光度計的波長的準確度。它在測試不同的儀器時,作用非常大,是非常關(guān)鍵的技術(shù)指標。


    在我國,計量檢定工作,波長準確度是很重要的。檢定紫外可見分光光度計的波長準確度有很多的方式,下面將通過兩種方法進行壽命說明:汞燈和氖燈的利用。


    汞燈


    我國在對紫外分光光度計波長準確度進行檢定時,很多的生產(chǎn)廠一般都廣泛利用汞燈進行測試。具體的操作流程就是:


    將原光源拆下來,采用標準燈,對標準光源燈各條的特征譜線進行測試,波長準確度就是測量值和理論值做差。


    自利用汞燈進行測試的過程中,能量測量作為測量的方式,波段的范圍設(shè)置在245-560nm范圍之內(nèi),空氣作為樣品的參考系,光譜帶的寬設(shè)置為2nm,再通過波長掃描。波長準確度就是汞燈的各特征波長的測量值和其相應的理論值之差。為了確保準確度,可以重復進行3次,波長準確度就選擇3次的平均值。


    氖燈


    在對紫外可見分光光度計的波長準確度進行檢測時,通常人們在選用標準燈時用氖燈。在儀器紫外區(qū),由于氖燈的連續(xù)光譜優(yōu)勢,就會在紫外區(qū)作為光源。


    在可見區(qū),由于光譜中波長為656.1nm和為486.0nm是很容易分離的,而且具有高的強度,譜線特征非常明顯,所以對儀器波長準確度進行檢定時可以利用譜線。在我國,對于儀器進行計量檢定都會用波長準確度較為高的標準燈-氖燈。


    波長重復性及其檢定方法


    多次測試波長之后數(shù)據(jù)符合程度,也就是多次測試波長的數(shù)據(jù)離散性就是波長的重復性(WavelengthRepeatability)。檢定波長的重復性方法,操作簡單。種方法,測試波長的準確度之后,測試三次取平均值,波長重復性就是通過和3次測試中小值或者值做的差;第二種,測試波長的準確度,要經(jīng)過3次測試,波長重復性就是值與小值之差。


    光度準確度及其檢定方法


    光度的實際測定值和理論值之差就是光度準確度(PhotoMtricAccuracy)。它倆之間的差越小,測量就會更準確,光度的準確度就會更高。一般,表示紫外可見分光光度計光度的準確度有以下兩種方式:


    ①透射比誤差或者透射比準確度(TransmittanceAccuracy),表示用TA(或AT);②吸光度誤差(AbsorbanceError)或者是吸光度準確度(Absorbd-nceAccuracy),在表示用AA(或AA)時,要注意測量時具體的吸光度情況。


    3.紫外可見分光光度法的合理化運用


    溶液中物質(zhì)含量的測定


    應用紫外可見分光光度計測定標準溶液和未知液的吸光度進而進行比較;也可先測出不同濃度標準液的吸光度,繪制標準曲線,在一定濃度范圍內(nèi)標準曲線為直線,然后測定出未知液吸光度,即可從標準曲線上查到其對應濃度。


    化合物的鑒定


    用不同波長的單色光分別通過某一濃度溶液,測定每一種單色光的吸光度,之后分別以波長和分光度作為橫坐標和縱坐標,繪制得到吸收光譜曲線。


    不同食品有其特定的吸收光譜曲線,借此可以鑒定食品種類。紫外吸收光譜分析主要用于已知物質(zhì)定量分析,測定化合物中含有微量的具有紫外吸收的雜質(zhì)。


    反應動力學研宄


    借助于分光光度法可得出特定化學反應速度常數(shù),借此從兩個或兩個以上溫度條件下的速度數(shù)據(jù)得出反應活化能。


    絡合物組成和穩(wěn)定常數(shù)的測定金屬離子可與有機物形成絡合物且在紫外可見區(qū)有吸收,據(jù)此可利用分光光度法來研宄其組成。


    總之,紫外可見分光光度法是利用物質(zhì)分子對紫外可見光譜區(qū)的輻射的吸收來進行分析的一種儀器分析,這種分子吸收光譜產(chǎn)生于價電子和分子軌道上的電子在電子能級間的躍遷。


    朗伯-比耳定律是光吸收的基本定律,是分光光度法定量分析的依據(jù)和基礎(chǔ)。紫外可見分光光度計在食品檢驗中應用廣泛,主要包括定量、定性和結(jié)構(gòu)分析以及反應動力學和溶液平衡研宄。


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